какая группа крови у поросят

Способ определения групп крови у свиней

Владельцы патента RU 2300880:

Изобретение относится к иммуногенетике. Способ включает взятие образцов крови у животных, получение суспензии эритроцитов путем смешивания образцов крови с физиологическим раствором и последующего центрифугирования, постановку реакции с использованием 96-луночных пластиковых плоскодонных планшетов, в которые вносят суспензии эритроцитов и иммуноспецифические сыворотки, встряхивание планшетов, помещение их в термостат на инкубацию и читку реакции. При этом встряхивание планшетов осуществляют с помощью планшетного фотометра, а перед помещением планшетов в термостат у образцов также с помощью планшетного фотометра определяют степень поглощения видимого света с длиной волны 630-650 нм. Затем осуществляют инкубацию образцов в термостате при температуре 37°С в течение 40 минут. После чего образцы дополнительно встряхивают и инкубируют еще в течение 1,5-2,0 часов и снова определяют степень поглощения видимого света с длиной волны 630-650 нм. Читку реакции осуществляют путем вычитания показателей степени поглощения видимого света образцами после инкубации из показателей степени поглощения видимого света образцами до инкубации. После чего полученные значения переводят в баллы серологического теста. Способ позволяет повысить объективность оценки при сокращении трудозатрат на тестирование животных. 6 табл.

Изобретение относится к иммуногенетике, в частности к способам тестирования свиней по эритроцитарным антигенам или группам крови. Контроль происхождения (отцовства) племенных животных в РФ является обязательным условием для ведения селекционной работы (Ст.19 Закона РФ «О племенном животноводстве»). Государственной программой «Генетическая экспертиза племенной продукции (материала) в Российской Федерации» (приказ Минсельхоза РФ №291 от 19 мая 1998 года) в качестве обязательного мероприятия предусмотрено проведение генетического тестирования и использование полученных данных в племенной работе. Начало использования генетических маркеров при разведении сельскохозяйственных животных дала наука иммуногенетика, а именно исследование групп крови (эритроцитарных антигенов). Анализ систем групп крови и сегодня остается основным методом генетического контроля происхождения животных. Определение групп крови у свиней проводят, используя серологические реакции агглютинации и гемолиза с применением иммуноспецифических сывороток.

Задача изобретения заключалась в разработке более эффективного способа определения групп крови свиней.

Пример. Контрольное использование предложенного способа тестирования свиней по эритроцитарным антигенам проводили на свиньях породы йоркшир канадской селекции ЗАО «Агроиндустрия» Орловской области.

1) Отбор крови свиней в объеме 3-5 мл осуществляли из ушной вены в пробирки с антикоагулянтом в соотношении 1:4;

2) 96-луночные пластиковые плоскодонные плашки обрабатывали дезактивирующим раствором (фосфатно-солевой буфер + 10% бычьего альбумина) с целью дезактивации адсорбирующих свойств поверхности лунки, помещали их в термостат, где выдерживали 20-40 минут при температуре 37°С, после чего дезактивирующий раствор сливали, а плашки высушивали;

3) 0,4 мл крови помещали в 2,0 мл пластиковые пробирки, смешивали с 1,6 мл физраствора, после чего центрифугировали на центрифуге ТЭТА 10 при 7000 об/мин в течение 3 мин;

4) надосадочную жидкость сливали, в пробирки добавляли новый физраствор в объеме 1,6 мл, все смешивали и вновь центрифугировали в том же режиме;

5) для получения 2,5% суспензии эритроцитов из осадка, полученного при центрифугировании, дозатором отбирали 0,02 мл и смешали с 0,78 мл физраствора;

6) раскапывание производили с помощью 8-канальных дозаторов переменного объема в 96-луночный плоскодонный планшет. Первоначально раскапывали сыворотку в объеме 0,05 мл, а затем и суспензию эритроцитов в объеме 0,05 мл. Планшеты встряхивали с помощью планшетного фотометра DYNEX MRX Revelation;

7) определяли степень поглощения образцами видимого света с длиной волны 630-650 нм до начала реакций с использованием планшетного фотометра DYNEX MRX Revelation в режиме агглютинации (матрица А), таблица 1;

8) затем планшет помещали в термостат и проводили инкубацию реакций при температуре 37°С в течение 40 мин, после чего еще раз его встряхивали и инкубировали еще в течение 1,5-2,0 часов;

9) определяли степень поглощения образцами видимого света с длиной волны 630-650 нм после проведения реакций с использованием планшетного фотометра DYNEX MRX Revelation в режиме агглютинации (матрица В), таблица 2;

10) для идентификации результатов реакций проводили вычитание результатов степени поглощения света средой до (матрица А) и после проведения реакций (матрица В). То есть из значений таблицы 1 вычитали значения таблицы 2. При наличии реакции агглютинации наблюдали более существенные различия в изменении степени поглощения света средой, чем в случае ее отсутствия;

11) полученные цифровые значения переводили в баллы серологического теста:

12) в конечном итоге получаем таблицу 4 с результатами реакции агглютинации в баллах серологического теста;

Проведенное нами контрольное тестирование свиней по разработанному способу показало полное совпадение данных с результатами, полученными с использованием традиционного метода.

На чтение одной плашки (96 проб) в стандартной методике необходимо затратить не менее 10-15 минут в зависимости от лаборанта, его опыта и профессиональной подготовки, в предлагаемой нами методике на это необходимо затратить 1,5-2 минуты, что почти в 10 раз быстрее. Лабораториям иногда приходиться тестировать до 100 голов в день по 17-20 сывороток на голову, то есть до 2000 проб в день. При стандартной методике на это потребуется 1,5-2 часа, в новой методике на это уйдет примерно 15-20 минут.

Предложенный способ характеризуется меньшей трудоемкостью, более высокой производительностью и объективной идентификацией результатов реакций за счет мультисканирования на основе планшетного фотометра.

Данное изобретение может быть использовано в разведении свиней, в частности в оценке достоверности происхождения и маркерной селекции.

Способ определения групп крови у свиней, включающий взятие образцов крови у животных, получение суспензии эритроцитов путем смешивания образцов крови с физиологическим раствором и последующего центрифугирования, постановку реакции с использованием 96-луночных пластиковых плоскодонных планшетов, в которые вносят суспензии эритроцитов и иммуноспецифические сыворотки, встряхивание планшетов, помещение их в термостат на инкубацию и читку реакции, отличающийся тем, что встряхивание планшетов осуществляют с помощью планшетного фотометра, а перед помещением планшетов в термостат у образцов также с помощью планшетного фотометра определяют степень поглощения видимого света с длиной волны 630-650 нм, после чего осуществляют инкубацию образцов в термостате при температуре 37°С в течение 40 мин, а затем образцы дополнительно встряхивают и инкубируют еще в течение 1,5-2,0 ч, после чего у образцов с помощью планшетного фотометра также определяют степень поглощения видимого света с длиной волны 630-650 нм, при этом читку реакции осуществляют путем вычитания показателей степени поглощения видимого света образцами после инкубации из показателей степени поглощения видимого света образцами до инкубации, а полученные значения переводят в баллы серологического теста.

Источник

Существуют ли группы крови у животных

Знаете ли вы свою группу крови? А группу крови своего кота?

Группа крови — это антигенные характеристики эритроцитов по типу углеводов и белков в их мембранах. Поэтому если эти группы не совпадают, организм будет враждебно реагировать на такую кровь. У человека существует несколько систем антигенов в разных группах крови (всего систем 36), но обычно ее определяют в системе AB0 (O I, A II, B III и AB IV) и ее принадлежность к резус-фактору (-/+). Что касается животных, то у них существуют свои системы, которые не пересекаются с человеческой.

Например, у собак есть семь популярных групп, которые также имеют свой резус-фактор (всего у собак было выявлено около 13 групп крови). Все они являются разновидностью DEA — антигена собаки, который доминирует в их эритроцитах. В системе DEA есть несколько групп: 1.1, 1.2, 3, 4, 5, 6 и 7. Часто псы одной породы имеют одну и ту же группу, например, 60% борзых имеют отрицательную DEA 1.1. Интересно, что 98% собак совместимы с DEA 4 и только 42% с DEA 1.1. Однако на сегодняшний день, ученые продолжают находить новые группы крови у собак. Недавно, специалисты установили, что у далматинцев есть своя группа — Dal.

Источник

Какие существуют группы крови?

Существует 4 группы крови.

Система ABO

В конце XIX в. Австралийский ученый Карл Ландштайнер, проводя исследование эритроцитов, обнаружил любопытную закономерность: в красных кровяных клетках (эритроцитах) некоторых людей может быть специальный маркер, который ученый обозначил буквой А, у других — маркер В, у третьих не обнаруживались ни А, ни В. Позже выяснилось, что описанные Ландштайнером маркеры — особые белки, определяющие видовую специфичность клеток, или антигены. Фактически эти исследования поделили все человечество на 3 группы крови.

Четвертая группа была описана в 1902 году учеными Декастелло и Штурли. Совместное открытие ученых получило название системы АВО.

Люди с первой группой крови 0(I) — универсальные доноры, так как их кровь с учетом системы АВ0 можно переливать лицам с любой группой крови. Обладатели четвертой группы крови АВ(IV) относятся к категории универсальных реципиентов. Им можно переливать кровь любой группы.

Однако сейчас медики стремятся к тому, чтобы переливать человеку идентичную группу крови. От этого правила отступают лишь в крайних случаях.

Резус-фактор

В отличие от антигенов группы крови, резус-фактор-это антиген, обнаруженный только в мембране эритроцита и не зависящий от других факторов крови. Резус-фактор передается по наследству и сохраняется в течение всей жизни человека. 85% людей, в эритроцитах которых находится резус-фактор, обладают резус-положительной кровью (Rh+), кровь остальных людей не содержит резус-фактор и называется резус-отрицательной (Rh-).

Келл-фактор

Система Kell — это система группы крови, в которую входят 25 антигенов, в том числе самый иммуногенный после А, В и D, антиген К.

На основании наличия антигена K в эритроцитах или его отсутствия все люди могут быть разделены на две группы: Kell-отрицательные и Kell-положительные. Наличие антигена К (Kell-положительный) не является патологией и передается по наследству, как и другие групповые антигены человека. В России он встречается у 7-10% жителей.

В настоящее время в учреждениях службы крови определяют наличие антигена К, как наиболее опасного для возникновения иммунологических осложнений. Описаны многие случаи гемотрансфузионных осложнений и гемолитической болезни новорожденных, причиной которых была изоиммунизация антигеном К.

Kell-отрицательным должна переливаться только кровь от доноров, не имеющих антиген К для предотвращения гемолиза. Лица же Kell-положительные являются универсальными реципиентами крови, так как у них не происходит отторжения её компонентов.

В целях профилактики посттрансфузионных осложнений, обусловленных антигеном К системы Kell, отделения и станции переливания крови выдают для переливания в лечебные учреждения эритроцитную взвесь или массу, не содержащие этого фактора. При переливании всех видов плазмы, тромбоцитного концентрата, лейкоцитного концентрата антиген К системы Kell не учитывают.

Поэтому Kell-положительным донорам рекомендуется донорство плазмы.

Интересные факты

Японцы уверены, что на характер человека влияет группа крови. Японский ученый Масахито Наоми, на основании исследований вывел такую зависимость между группой крови и характером человека.

Первая группа крови — самураи. Эти люди обладают ярко выраженными лидерскими качествами. Они амбициозны, самоуверены, как правило, занимают высокие должности.

Вторая группа крови — крестьяне. Это перфекционисты. Такие люди консервативны во всем, они чтят традиции и не привыкли менять свои привычки и уклад жизни. Он достаточно сдержаны, упрямы, на все имеют свое мнение.

Третья группа крови — торговцы. Оптимистичные, страстные натуры. Могут быть эгоистичны, на первое место всегда ставят свои интересы, никогда не упустят своей выгоды.

Четвертая группа крови — ремесленники. Характер по группе крови этих людей характеризуется рациональным складом ума. Они настойчивы и могут быть злопамятны.

Источник

Методы отбора проб крови у свиней для лабораторных исследований

Кровь – жидкая ткань организма, выполняющая ряд функций, одной из которых является транспортная. Осуществляя в организме транспорт химических веществ, происходит интеграция биохимических процессов в различных клетках и межклеточных пространствах в единую систему. Правильно отобранные образцы крови предоставляют возможность мониторинга нозологического профиля поголовья, уровня метаболических процессов, обеспеченности организма витаминами, минералами, незаменимыми аминокислотами и т.д. Для получения достоверных результатов необходимо свести к минимуму возможность появления артефактов, обусловленного нарушением правил отбора проб крови, ее стабилизирования и транспортировки.

Иглы перед взятием крови от каждого животного обязательно стерилизуют кипячением, либо применяют стерильные. Оптимальным вариантом является использование шприц-пробирок или вакуумных пробирок. При их использовании кровь не контактирует с внешней средой, т.е. остается асептической и не подвергается окислению кислородом воздуха, тем самым предупреждается агрегация тромбоцитов и образование сгустков в образцах, предназначенных для полного определения клеточного состава крови. Место пункции необходимо обработать 70%-ным спиртовым раствором или 3%-ным раствором карболовой кислоты. При заборе крови нужно следить, чтобы она стекала по стенке в пробирку струей, а не каплями. Кровь, взятая каплями и вспененная, быстрее гемолизируется и часто дает неправильные результаты показаний при лабораторных исследованиях.

Таблица 1. Влияние гемолиза на результаты исследований биохимических компонентов сыворотки крови

Существует несколько способов отбора проб крови у свиней. Среди них можно выделить:

Данный способ подходит, если необходимо отобрать небольшое количество крови (2-3 мл). Для асептического отбора используется шприц с иглой толщиной 0,8 мм (типа Луер), и отбор крови осуществляется при внутривенном введении иглы, в противном случае происходит бакобсемененность образца. Вены уха свиньи, как правило, расположены в трех точках уха и легко различимы. Одна вена располагается вдоль внешнего края уха, другая – посередине, третья – около 2 см от медиального края. Хвостовые вены находятся в вентральной части хвоста. Для этого способа взятия крови требуются иглы 0,8х25 мм.

После отбора крови необходимо удалить иглу, а место пункции пережать лещеткой, лигатурой или большим пальцем руки на 2-3 минуты. Опасность метода состоит в том, что лигатура может произвольно соскочить и произойдет обескровливание организма животного.

Это безопасный и быстрый способ отбора крови, требующий правильной фиксации животного. Для этого используют металлическую петлю или веревку, при помощи которых животное фиксируется в стоячем положении. При фиксации голова поросенка должна быть поднята вверх таким образом, чтобы шея образовала прямую линию, а кожа была натянута.

Отбор крови производят с правой стороны (при дыхательной недостаточности, развивающейся у свиней при пневмонии или плевропневмонии возможно при введении иглы повреждение левого диафрагмального или блуждающего нерва, поэтому рекомендуется введение иглы справа). Точка пункции находится на краю плечеголовной мышцы – внешнего края яремного желоба, на линии между краем плечевого сустава и рукояти грудной кости (рис 1, 2). Вторая линия проходит от рукояти грудной кости к основанию уха. Глубина прокола для взрослых животных составляет от 75 до 100 мм, для маленьких поросят – 40-75 мм.

Рис. 1. Поверхностные мышцы шеи свиньи

Рис. 1.1. Сеть венозных сосудов шеи

Рис. 2. Место пункции яремной вены

Рис. 3. Забор крови из яремной вены

После введения иглы под кожу поршень шприц-пробирки необходимо отвести назад для создания в ней отрицательного давления. Игла вводится в дорсомедиакаудальном направлении (рис. 3). Когда кровь начинает поступать в пробирку, необходимо следить, чтобы она не вспенивалась, не капала, не билась о дно, а плавно стекала по стенке – с целью предупреждения гемолиза эритроцитов.

Если игла с первого раза не попала в яремную вену, ее необходимо отвести назад и вводить в слегка измененном произвольном направлении. Если и в этот раз цель не достигается, иглу необходимо заменить. При наличии кровотечения после извлечения иглы, место пункции необходимо прижать большим пальцем руки до ее полной остановки.

Таким образом, если целью отбора крови является получение достоверных результатов, необходимо четко следовать методическим требованиям при отборе, хранении и транспортировке проб. В современных условиях (насыщенности ветеринарной программы, удаленности лаборатории от производства, отсутствия необходимого инвентаря и оборудования) этого сделать практически невозможно. Поэтому при интерпретации полученных из лаборатории результатов, необходимо учитывать все факторы, которые могут на них повлиять. Четкой границы, дифференцирующей патологию от физиологической нормы, у свиней не существует. На полученные из лаборатории результаты можно ориентироваться, но 100% им доверять нельзя.

Источник