Нематоды в рыбе что делать
ВГКБ № 2
БУЗ ВО «Воронежская городская клиническая больница №2 им. К.В. Федяевского»
Глисты в аквариуме: как выглядят, причины появления у рыб, как избавиться
Каждый, кто содержит аквариум, хотя бы раз сталкивался с белыми червячками, появляющимися в нем. Чаще всего это нематоды или попросту говоря, круглые черви, обитающие в любой среде, которой может выступать почва и вода. Опытный аквариумист сразу скажет, что ничего страшного в этом нет, тогда как новичок будет явно испуган появлением гельминтов в аквариуме с домашними рыбками.
Для человека, любые черви это что-то неприятное и жуткое, поэтому после их обнаружения многие даже боятся опускать в воду руки, не говоря уже о полноценном уходе за своим рыбками.
Предполагается, что паразиты появляются только в запущенных случаях, когда человек не заботится о емкости и содержимом. Но это не так, ведь нематоды в аквариуме могут развиваться быстрыми темпами, независимо от того какие условия создал аквариумист.
На сегодняшний день, этот круглые черви являются самым распространенным видом гельминтов и поражают человека, животных и растения. Некоторые подвиды нематод достигают огромных размеров, практически до 8 метров в длину. Существует около 20 тысяч разновидностей данного глиста, все они обитают не только в людях или животных и могут встречаются у рыб, ракообразных, диких животных, а также у растений, например у грибов или злаковых.
Как показали медицинские исследования, самые крупные круглые черви были замечены у китов и достигали нескольких метров в длину, но чаще всего, нематоды — это мелкие паразиты длиной несколько миллиметров.
Если вы заметили белых червей на стенках своего аквариума, не стоит пугаться, конечно, это неприятное ощущение, что помимо рыбок у вас в аквариуме находятся какие-то паразиты, но от них можно избавиться.
Наиболее распространенные гельминты, появляющиеся в аквариуме
Давайте сначала разберемся, что представляет собой паразит. Можно выделить три вида червей, которые наиболее часто поселяются в аквариуме:
Нематоды
Нематод также называют микрочервями, они действительно самые распространенные во всем мире и являются многоклеточными организмами. Чаще всего свободно плавают по всему аквариуму, как самостоятельно, так и благодаря струе воды от аквариумного фильтра.
Многих интересует вопрос, опасны ли нематоды в аквариуме и можно ли уничтожить гельминта не нанеся вреда рыбкам? На самом деле, избавиться от них можно в короткие сроки, при этом сами гельминты никак не воздействуют на обитателей аквариума, но явно доставляют немало проблем его хозяину. Согласитесь, это неприятно, наслаждаться рыбками и вдруг замечать как мимо них проплывают мелкие белые черви.
Появление белых червей возможно сразу же после покупки водорослей, часто именно в растительности скрывается большое количество паразитов, которые впоследствии засоряют аквариум.
Гидра
Гидра — вид белого червя, который обитает в воде, а главной особенностью является возможность расти даже после того как ее разделят пополам. Новые особи моментально «оживают» и ведут полноценный образ жизни. Они также совершенно безопасны для рыбок и других обитателей аквариума.
Теоретически, взрослая гидра может поедать икру и мальков, однако как показывает практика, на самом деле это происходит крайне редко. Как правило, гидрам хватает и обычного аквариумного корма, который вполне подходит им по своим питательным свойствам.
Планарии
Планарии также являются разновидностью паразитов, которые обитают в воде. Это очень опасные черви, сильно отличающиеся от нематод. Проблема в том, что их невозможно обнаружить, поскольку они часто прячутся в водорослях или даже в грунте,поскольку взрослые особи не переносят светлое время суток.
По внешнему виду планария имеет некоторые визуальные отличия от вышеперечисленных гельминтов. В верхней части, голова червя значительно толще, по сравнению со всем остальным телом.
Если разделить планарию на несколько частей, все они будут вести полноценную жизнь, отрастая вновь. Эти паразиты едят все что им попадается, и чем больше еды, тем активнее происходит их размножение. Из-за планарии страдают рыбы, так как гельминт поедает мальков и икру, порой они могут нападать даже на ракообразных.
Избавление от червей
Белые черви доставляют много хлопот владельцам аквариумов. Они появятся от переизбытка корма, некачественной пищи, с новыми водными растениями и украшениями. Если вы не знаете, какой паразит завелся, попробуйте поднять температуру воды на несколько градусов, добавьте поваренную соль. Аквариумным обитателям это не навредит, а обычных нематод убьет.Если же не помогло, значит, белый червь – паразит. Способы избавления от паразитов в аквариуме зависит от вида гельминтов:
Если аквариум не населен растениями, уберите из него рыб, нагрейте воду до 40 градусов. Выдержать температуру следует на протяжении 2 часов.
Рыба, зараженная нематодам
Паразитарные черви, таких видов более 6000, заражают аквариумных рыб. Особенно это касается экзотических видов из тропик. Если это случилось, одна особь в течение нескольких месяцев уничтожит всю стаю рыб. Заражаются они как друг от друга, так и через отходы жизнедеятельности.
Если заражение произошло недавно, понять о недомогании можно по вялости рыбы и обильном употреблении корма. По мере развития паразитов, брюхо раздувается, может искривляться позвоночник. В итоге рыбка погибнет.
К какому бы виду ни относились нематоды, их присутствие в аквариуме приносит дискомфорт. Если справиться с гельминтами не получается, обратитесь в специализированный магазин. Консультанты помогут подобрать правильное средство для борьбы с гельминтами.
Что такое нематода
Нематоды относятся к типу круглых червей, имеют размер, не превышающий 2 мм. Эти существа относятся к первичноротым — таксону, который входит в группу линяющих. На сегодняшний день зоологи описали и систематизировали свыше 24 000 видов нематод-паразитов, а также их свободноживущих разновидностей.
Основные виды
Существуют свободноживущие круглые черви и нематоды-паразиты. Рассмотрим их особенности.
Обычные
Излюбленным ареалом обитания свободноживущих круглых червей являются пресноводные водоёмы, моря и почва. В подобной среде их плотность может достигать 1 млн/куб. м, нематоды принимают активное участие в функционировании экосистем.
Свободноживущие круглые черви опасности для живых организмов не представляют, срок их жизни — не более нескольких дней. Они крайне зависимы от наличия воды, колебания концентрации влаги для них смертельны. Солёные почвы для них тоже не подходят.
Паразитарные
А вот паразиты отличаются крайне высокой жизнестойкостью. Они переносят любые воздействия агрессивной среды и неблагоприятные внешние факторы. Особенностью червей является то, что в такие периоды жизненного цикла заметно усиливается их функция размножения.
В аквариуме паразитирующие черви способны в кратчайшие сроки заразить и вскоре истребить всё поголовье рыбок и растительности. Нематоды развиваются в несколько стадий, могут иметь двух и более хозяев: личинка паразитирует на одном живом существе, взрослый червь перебирается на другое. Развиваясь, паразит путешествует из одного органа в другой, оставляя там личинки, заражая таким образом организм полностью. Большая часть представителей рода паразитирует (или существует в качестве комменсала) практически на всех видах живых существ — от простейших до человека. Нематоды, паразитирующие на растениях, вызывают нематодные болезни, у живых существ развиваются нематодозы.
Нематодные болезни растений поражают корневую систему, для живых организмов опасность представляют инвазионные болезни. Наиболее известные паразиты данного типа, встречающиеся у человека: острицы, аскариды, трихинеллы.
Причины появления тонких белых червей в аквариуме
Нематоды могут появиться в чистом аквариуме, который, перед тем как запустить туда рыбок, был подвергнут дезинфекции. Существуют две основные причины этого явления:
Нужно ли бояться нематод в аквариуме? Как от них избавиться
Что такое нематоды?
В природе насчитывается до 24 тыс. видов нематод. Это длинные черви с круглым в поперечном сечении, гладким тельцем. Их длина составляет от 80 мкм до 8,4 м. Самки обычно больше, и могут иметь бочковидную или лимоновидную форму. Голова проявляет признаки трехлучевой симметрии.
Нематоды преимущество разнополые, но встречаются и гермафродиты. Для размножения черви откладывают яйца. Однако учены обнаружили и живородящие виды этих представителей фауны.
Виды нематод
Нематоды бывают свободноживущими и паразитическими. Первые не наносят вреда водным обитателям. Вторые — весьма опасны и могут стать причиной гибели рыбы.
Свободноживущие нематоды являются важным компонентом своей экосистемы. Они обитают в почве, соленых и пресных водоемах. Многие виды оседают на дне и перерабатывают органику. В аквариуме свободноживущих нематод сложно не заметить, поскольку они находятся в постоянном движении и напоминают тонких змеек, популяция которых довольно быстро разрастается.
Ряд представителей нематод стали паразитами или комменсалами животных. Такие черви вызывают инвазионные болезни у растений, животных, рыб и даже людей.
Паразитарные виды заражают рыб через продукты жизнедеятельности или напрямую. Нематоды чаще всего поражают тропические виды аквариумных позвоночных.
Одна пораженная глистами рыбка может за несколько месяцев заразить всю колонию.
Почему аквариум атакуют нематоды?
Источником заражения аквариума нематодами могут выступать:
Одна из причин, по которой круглые черви начинают стремительно размножаться — перекармливание рыб. Остатки несъеденной пищи оседают на дне и превращаются в прекрасную питательную среду для развития нематод.
Чем опасны нематоды?
Свободноживущие нематоды в аквариуме не представляют опасности для его жителей. Некоторые виды рыб, молодняк охотно лакомится небольшими червями, напоминающими маленьких глистов или грибной мицеллий, поскольку в паразитах есть весь нужный спектр питательных веществ.
Хуже обстоят дела с паразитическими видами. Эти черви заражают как аквакультурную, так и дикую рыбу. Высокая нагрузка приводит к болезням и гибели хозяина.
Всего известно более 600 видов круглых червей, опасных для рыб. Наиболее распространены:
Взрослые особи паразита обнаруживают в пищеварительных органах рыбы, а некоторые виды селятся в других отделах организма, включая глубокие слои кожи, плавников и др.
При незначительном инфицировании стадо может не иметь симптомов заболевания. Однако способность к репродукции у таких особей снижается. Молодняк, инфицированный паразитом, плохо развивается.
В случае заражения необходимо определить рыбку-носителя. На начальной стадии особь ничем не отличается от сородичей, но есть больше обычного. Постепенно появляется вялость, брюшко становится округлым и раздувается.
Рыба зараженная нематодами
При большом количестве червей в теле рыбы ее позвоночник деформируется, что приводит к гибели зараженной особи.
На заражение нематодами также указывают:
Диагностика
Точный диагноз ставят, изучая организм умерщвленной рыбы. Другой способ диагностики — биопсия поврежденных внешних тканей. Также можно исследовать фекалии рыб на яйца паразита. Испражнения должны быть свежими, поскольку через несколько часов биоматериал колонизируют непаразитические виды нематод. Второй способ диагностики чаще всего используют для ценных пород рыбы.
Как бороться?
Существуют и более радикальные методы борьбы. Опытные аквариумисты делятся, что можно уничтожить популяцию нематод, прогревая воду до 40–45 °С. Перед процедурой из аквариума удаляют рыб, растения. Декорации извлекаются, промываются и обеззараживаются. После того, как вода остынет до нужно температуры, растения и рыб возвращают в резервуар. Подогрев воды избавляет даже от особей, окопавшихся в грунте или скрывшихся за камнями.
Ученые выяснили: то, что рыбам плохо, паразитам — благо. Чем хуже условия в аквариуме, тем активнее черви размножаются. Они способны выживать даже при полном отсутствии кислорода. Но вот без влаги они погибают. Сложнее всего бороться с нематодами-паразитами.
Лечение рыбы
До лечения аквариум очищают от органического дебриса, фекалий. Это позволит избежать вторичного заражения. Больную рыбу помещают на карантин.
Для лечения рыб от круглых червей используется два препарата:
Левамизол
Препарат применяют как добавку к корму и для ванной. Дозировка — 4 г на 1 кг корма раз в неделю курсом 3 недели. Для ванной препарат разводят по 2 мг/л и обрабатывают 24 часа. Лечение повторяют через 2–3 недели.
Фенбендазол
Средство используется только как добавка к корму. Препарат используют в дозировке по 2,53 г на 1 кг корма каждые 3 дня. Повторную обработку проводят через 14–21 день.
Против глистов используют и другие антигельминтные препараты:
Tetra Medica CestoNemaEx
(дифлубензурон) Дозировка — 20 мл. на 400 л. воды.
Sera Med Professional Nematol
Дозировка — 10 мл. на 400 л. воды.
JBL Nemol
(бензимидазол) Дозировка — 100 мл. на 400 л. воды.
Эти препараты имеют широкий спектр действия, и могут применяться для борьбы с другими червями.
Сложнее всего лечить рыб, у которых инфицирован не ЖКТ, а другие органы. Часто единственным способом терапии внекишечных форм глистной инвазии является хирургическое вмешательство. Поэтому зараженных рыб обычно отбраковывают.
Профилактика
Ряд простых мер избавит от необходимости бороться с червями.
Каждые 7 дней необходимо чистить аквариум и частично менять воду. Перед тем, как использовать камни, декорации, их тщательно дезинфицируют. Камни очищают от мха и грязи, прокаливают в духовке.
Декор тоже промывают тепло водой, и, если позволяет материал, оставляют в розовом растворе марганцовки на сутки, после чего ополаскивают и дают обсохнуть. Грунт, песок тоже можно подержать в духовом шкафу.
Если без живого корма не обойтись, то его лучше покупать в магазинах, а не добывать самостоятельно. Особо осторожными нужно быть при кормлении рыб трубочником, личинками насекомых, веслоногими ракообразными.
Черви, живущие в аквариуме, не вредят человеку. Этот вид нематод приспособлен к жизни только в пределах экосистемы аквариума.
Инфицироваться можно, съев зараженную сырую рыбу или проигнорировав правила гигиены.
Нет, этого делать нельзя, даже если особь выглядит здоровой. Сначала ее помещают на карантин, и лишь убедившись, что она не навредит другим жителям, перемещают на постоянное место.
Видео-советы по борьбе с нематодой в аквариуме
Паразиты в рыбе и рыбопродуктах. Паразитологическое исследование
Среди всех классов паразитов, встречающиеся в рыбе и других гидробионтах, опасными для здоровья человека являются только личинки гельминтов:
К наиболее широко распространенным заболеваниям, передающимся через рыбу и другие гидробионы, относятся описторхоз, дифиллоботриозы и эндемичные для Дальнего Востока России метагонимоз, нанофиетоз и клонорхоз (рис. 1).
Рисунок 1 – Паразитологическое исследование: а – Opisthorchis felineus; б – Diphyllobothrium latum
Поэтому при обнаружении личинок гельминтов следует определить жизнеспособность выявленных плероцеркоидод, метацеркарий, акантел и личинок нематод (рис. 2).
Рисунок 2 – Обнаруженные личинки гельминтов: а – личинки описторхоз; б – плероцеркоиды (личинки) лентеца широкого в икре щуки
1. Отбор проб и подготовка проб к анализу
Для паразитологических исследований пробы берут отдельно от проб на микробиологические и физико-химические анализы. Отбор проб и объем рыбы, моллюсков, ракообразных, земноводных, пресмыкающихся и продуктов их переработки для исследования на соответствие требованиям безопасности для здоровья человека по паразитарным показателям осуществляется в соответствии с требованиями:
Отбор проб сырья (свежей, охлажденной и мороженой рыбы, морских беспозвоночных, молок, икры) и полуфабрикатов. Пробы отбирают в чистую посуду, полиэтиленовые мешки или плотную бумагу. Количество единиц упаковки, подлежащих вскрытию, установлены стандартами, нормативно-методическими документами. Если на продукт отсутствуют стандарты или научно-технические документы, то вскрывают 5 % единиц упаковки от общего их количества в партии [48, 49].
До начала исследования рыбы следует определить видовую принадлежность рыбы (по документам, сопровождающим пробу) и определить, какие виды гельминтов, опасные для здоровья человека, могут в ней находиться, руководствуясь МУК 3.2.988-00 и СанПиН 2.3.2.1078 [23].
Для исследования на наличие метацеркарий Opisthorchis felineus и плероцеркоидов Diphyllobothrium latum целесообразнее отбирать рыб старших возрастов, так как личинки паразитов живут несколько лет, и их число увеличивается с возрастом рыб. Метацеркарий Metorchis bills (albidus) чаще встречается у сеголеток и рыб младших возрастов, а Echinochasmus perfoliatus – преимущественно у мальков.
Хранение и подготовка к исследованию рыбы проводится следующим образом.
2. Гельминтологическое исследование рыбы
При исследовании используют два подхода: выявление личинок, видимых невооружённым глазом (плероцеркоиды, акнтелы, нематоды), и выявление личинок, невидимых вооружённым глазом с использованием оптических средств (трематоды). При этом проводят:
Рисунок 3 – Компрессорий
Метод параллельных разрезов. Самый употребительный метод, позволяющий сравнительно быстро обследовать мясо рыб крупной и средней величины, пригоден для рыб всех видов разделки.
Обследуемую рыбу желательно вначале обесшкурить, чтобы проверить, нет ли под кожей паразитов или поражений. Метод применяется для обнаружения в мышечной ткани рыбы личинок гельминтов, видимых без использования увеличительных приборов (цестод, нематод, скребней). Мышечную ткань острым скальпелем разрезают на пластинки толщиной от 5 до 10 мм, которые затем раздвигают и просматривают в падающем свете невооруженным глазом. Разрезы можно делать как поперек, так и вдоль мышечных волокон.
Делая разрезы мускулатуры и встречая в ее толще крупных личинок или капсулы с личинками (величиной около 1 см и более), нужно извлечь несколько экземпляров паразитов целиком для определения вида. Выделенных личинок помещают в чашку Петри. При исследовании тихоокеанских лососей, кунджи и сахалинского тайменя на наличие плероцеркоидов Diphyllobothrium luxi (D. klebanovskii) разрезы проводят поперек мышечных волокон всей дорсальной части тела, большинство личинок локализуется между жировым и спинным плавниками [47, 48].
Метод исследования мышечной ткани на просвет. Это наиболее эффективный метод, позволяющий быстро обследовать большие количества рыбы и рыбной продукции. Используется для выявления личинок нематод, цестод, скребней. Для использования этого метода нужно иметь специальные приспособления – столик с прозрачной (лучше из молочного или матового стекла) крышкой и подсветкой снизу.
Рыба всех видов разделки перед обследованием должна быть обесшкурена, филе толщиной до 3–4 см просматривается целиком, сначала с одной, а потом с другой стороны. У рыбы других видов разделки мясо срезается с костей так, чтобы получившиеся куски или филейчики достигали в толщину не более 3–4 см. Слишком толстые куски соответствующим образом разрезаются.
Паразиты – личинки цестод, трематод и нематод, паразитические ракообразные и другие включения размером от нескольких миллиметров и более – обычно хорошо заметны на просвет, даже в довольно толстых филейчиках. Обнаруженных личинок гельминтов выделяют из мышечных тканей рыбы с помощью препаровальных игл. Выделенных личинок помещают в чашку Петри и определяют видовую принадлежность гельминта (рис. 4).
Рисунок 4 – Исследование мышечной ткани на просвет
Компрессорный метод. Метод применяется в основном для выявления метацеркарий трематод, им можно пользоваться лишь для выборочного контроля. Чаще всего метацеркарии поселяются в поверхностных слоях мышц на глубине до 2 мм и в подкожной клетчатке. Исследуются очень мелкие, незаметные или малозаметные невооруженным глазом объекты, поэтому для их обнаружения и дифференциации видовой принадлежности необходимы специальные микроскопические исследования. Используют метод при просмотре мышечной ткани и внутренних органов рыб, а также мышечной ткани ракообразных. Метод заключается в просмотре на просвет сдавленных между двух стекол кусочков мышечной ткани.
При компрессорном исследовании скальпелем удаляют чешую с одного бока под спинным плавником рыбы, затем надрезают кожу в двух направлениях. Первый разрез делают впереди спинного плавника перпендикулярно продольной оси тела до боковой линии, второй – от конца первого надреза по направлению к хвостовому плавнику вдоль боковой линии. Пинцетом поднимают край кожи и отпрепаровывают ее на площадки до 25 см 2 так, чтобы подкожная клетчатка осталась на поверхности мышц. После этого срезают поверхностный слой мышц толщиной 0,2–0,5 см, нарезают мелкими кусочками и размещают по всей поверхности нижнего стекла компрессора, покрывают верхним стеклом и сжимают винтами [48].
Просмотр осуществляется невооруженным глазом или при слабом увеличении бинокуляра микроскопа. Удобнее всего использовать кусочки мышечной ткани объемом около 2–5 см 3 и стекла размером около 9×20 см. Стекла должны быть толстыми, не менее 4–5 мм. Под малым увеличением микроскопа или под трихинеллоскопом просматривают все кусочки, взятые от одной рыбы. Личинки легко обнаруживаются (рис. 5).
Рисунок 5 – Компрессорный метод исследования
Обследование печени, молок и икры. Печень, молоки и икра обследуются отдельно от других частей рыбы. Вначале проводится внешний осмотр печени или ястыков. Снаружи, чаще всего на покрывающих их пленках или под ними, могут быть инкапсулированные личинки цестод и нематод. Особое внимание нужно обращать на личинок нематод, свернутых в плоские спирали; диаметр таких спиралей может составлять 2–6 мм.
Затем пленки надрезаются или разрываются, небольшие порции молок, икры или ткани печени помещаются на стекло и просматриваются компрессорным методом. При этом могут быть встречены личинки нематод или взрослые трематоды, хорошо видимые визуально, а также другие паразиты или включения [47, 49].
Компрессорным методом удобно просматривать лишь мелкую икру. Порции более крупной икры приходится разбирать препаровальными иглами в чашке Петри с небольшим добавлением воды. Замеченные паразиты или включения, а также имеющие необычный вид икринки, отбираются глазным пинцетом для последующего определения. Отбираются также участки тканей, имеющие ненормальный вид или консистенцию.
3. Жизнеспособность метацеркариев
Определяют следующим образом. Их изолируют от ткани, помещают в каплю физиологического раствора на предметном стекле, покрывают покровным и микроскопируют вначале под малым, а затем большим увеличением микроскопа. У погибших метацеркариев нарушена целостность оболочки, содержимое в состоянии зернистого распада, экскреторный пузырь разрушен, присоски слабо выражены. Живые метацеркарии в цисте подвижны. Подвижность вызывают механическим воздействием или подогреванием личинки (не выше плюс 40 °С).
Неподвижность личинки не свидетельствует о ее гибели. При исследовании свежевыловленной рыбы, а также при комнатной температуре, живые личинки бывают неподвижными. Поэтому исследуют большое количество личинок с применением тепла, а также учитывают степень выраженности присосок и экскреторного пузыря.
4. Критерии оценки условно годной и не пригодной в пищу рыбной продукции
Рыба и продукты её переработки, в которых не обнаружено живых личинок гельминтов, опасных для человека и животных, подлежат сертификации и реализации в установленном порядке. При обнаружении живых личинок гельминтов, опасных для человека и животных, рыба не допускается в реализацию и подлежит обезвреживанию.
В разряд «условно годная» переводят рыбную продукцию, в пробе которой обнаружена хотя бы одна живая личинка гельминтов. Рыбная продукция, переведённая в разряд «непригодная», направляется на утилизацию с составлением акта в установленном порядке. Режимы обработки «условно годной» рыбной продукции отражены в СанПиН 3.2.1333-03 «Профилактика паразитарных болезней на территории Российской Федерации». После обеззараживания проводят дополнительные санитарно-паразитологические исследования [24].
5. Паразитологические методы исследования рыбы и рыбных продуктов
Исследование проводят в следующем порядке: кожа, плавники, ротовая полость, жабры, глаза, кровь, сердце, брюшная полость (печень, селезенка, плавательный пузырь, мочевой пузырь, желчный пузырь, почки, половые железы, кишечник), мышцы, головной и спинной мозг.
Для обнаружения трипаносом и криптобий у рыбы берут кровь из сердца и делают мазки. Для предотвращения свертывания крови добавляют 1 %-й раствор лимоннокислого натрия, накрывают покровным стеклом и микроскопируют. Чтобы мазок не высыхал, края покровного стекла смазывают вазелином. Одновременно несколько мазков крови высушивают на воздухе, фиксируют в метиловом спирте, окрашивают по Романовскому-Гимзе или гематоксилином и микроскопируют [47, 48, 49].
Раствор метиленовой сини перед употреблением разводят дистиллированной водой 1:10 и окрашивают мазки 30 с, затем промывают водой и дифференцируют в течение нескольких секунд 5–10 %-м раствором танина. Эритроциты окрашивают в красноватофиолетовый цвет, плазма простейших кровепаразитов – в яркоголубой, ядра лейкоцитов – в фиолетовый (рис. 6).
Рисунок 6 – Мазок крови рыб
Для изучения морфологии паразитических инфузорий их окрашивают железным гематоксилином по Гейденгайну, а также гематоксицилином Делафильда или квасцовыми кармином.
Паразитических жгутиконосцев окрашивают железным гематоксилином или по Романовскому-Гимзе (рис. 7).
Рисунок 7 – Паразитические жгутиконосцы
Слизистых споров окрашивают 1 %-м водным раствором метиленового синего 30–60 мин, затем препарат промывают в воде, последовательно проводят через спирты возрастающей крепости (70, 80, 96 %-й и абсолютный) и просветляют ксилолом.
Трематод и цестод окрашивают квасцовым кармином. Фиксированные в спирте препараты промывают в течение нескольких часов в проточной или часто сменяемой воде и помещают в краску от 1 мин до нескольких часов (в зависимости от толщины гельминта). Продолжительность окраски можно контролировать микроскопией препаратов.
Окрашенные препараты переносят в дистиллированную воду, где в течение нескольких минут их тщательно отмывают от краски. Отмытых паразитов осторожно сушат фильтрованной бумагой и проводят через спирты возрастающей крепости (70, 80, 96 %-м), выдерживая в них несколько часов. Обезвоженных паразитов просветляют маслом и ксилолом.
Мелких цестод можно окрашивать молочнокислым кармином по Блажину. Молочную кислоту разводят в 2 раза дистиллированной водой, добавляют небольшое количество кармина (в зависимости от желаемой степени окраски). Жидкость кипятят. Красить лучше свежие, нефиксированные объекты. Продолжительность окраски контролируют под микроскопом, а в случае перекрашивания объект переносят в цельную молочную кислоту для обесцвечивания. Окрашенный препарат промывают 20–60 мин водопроводной водой и помещают в бальзам (рис. 8).
Рисунок 8 – Сосальщики (трематоды)
При окраске крупных цестод этот способ модифицировали. Цестод промывают в проточной или часто сменяемой водопроводной воде при комнатной температуре летом один день, в холодное время года – 3–4 дня. Затем их помещают на 4–6 ч в краску (0,3 г кармина на 100 мл 30 %-й молочной кислоты).
Интенсивность прокрашивания контролируют под микроскопом. После этого на сутки их переносят в дистиллированную воду, в которую добавляют 3 капли раствора сернокислого железа и 2 капли 1 %-го раствора фенола.
Далее цестод переносят на чистое предметное стекло, расправляют и высушивают при температуре плюс 30–37 °С. Высохший, очень плотно приставший к стеклу препарат заливают канадским бальзамом или канифолью, растворенной в смеси, состоящей из равных частей хлороформа и абсолютного спирта [47].
Постоянные препараты для микроскопического исследования нематод готовят следующим образом. Фиксированных в 70 %-м спирте живых гельминтов через сутки помещают на несколько часов (в зависимости от величины нематод) в 96 %-й, а затем в абсолютный спирт на 3–5 мин. После этого их переносят в гвоздичное или хеноподиевое масло или карбоксилол на 2–5 мин, а затем кладут на чистое предметное стекло и заливают бальзамом (рис. 9).
Рисунок 9 – Нематоды
Скребней (акантоцефалов) для изучения хоботка и крючков просветляют. Для этого их из 70 %-го спирта переносят сначала в 50 %-й глицерин, а затем в чистый. Структуру других органов изучают после полного обезвоживания гельминтов путем постепенного проведения их через спирты возрастающей крепости. Из абсолютного спирта гельминтов переносят на предметное стекло в каплю кедрового масла, покрывают покровным стеклом и микроскопируют.
Паразитических рачков исследуют в той же жидкости, в которой хранят. Красить их не обязательно. Иногда прибегают к окраске борным кармином, эозином, сафранином и др.